金斯瑞,助力首例Car-T临床试验中美双报成功,现向广大中国客户提供Car-T临床申报用质??⑸?。我们组建了一支具有GMP生产经验的专业团队;建设了1000平米符合GMP规范的生产车间并配备50L-100L的一次性生物反应器及不锈钢发酵罐;提供一站式质??⒎?,从稳定菌种库构建、工艺开发、方法学开发验证,稳定性研究等一直到临床试验申报。

3d试机号金码:金斯瑞Car-T用质粒平台

Development Process

3d343期试机号 www.kr5o.com.cn 菌种库构建

- Cell pool screening
- Cell clone screening
- Cell banking

工艺开发

- Culture optimization
- Purification optimization
- Small scale production

方法学

- Development
- Validation
- Batch release

规模生产


Manufacture Process

稳定菌种库的构建

金斯瑞拥有全面的稳定菌种库开发能力,从客户提供的DNA序列开始,经过质粒构建、分子克隆和转染、细胞池筛选,直到筛选出稳定、高表达的单克隆菌株。在确定稳定菌株后,我们将在GMP条件下建立RCB(初级菌种库), MCB (主菌种库)和WCB(工作菌种库)。

工艺开发

上游培养工艺: 主要是针对Animal-free 培养基、补料选择、添加方式及罐上发酵工艺的开发和优化。通过DOE设计,对pH、通气及溶氧进行范围控制,优化培养时间、温度等获得较高的表达水平及发酵稳定性。

下游纯化工艺: 主要是针对上样条件,包括上样体积及层析流速、洗脱程序的优化, 通过DOE设计优化层析柱及层析条件,为客户提供一个稳定的、可重复的、可放大的、经济的纯化工艺流程。

10L工艺小试生产: 根据工艺开发建立的流程,金斯瑞开展放大至10L小试生产。

方法学开发验证

符合《细胞治疗产品研究与评价技术指导原则》(试行)规定的分析方法的验证及确认,并建立质粒生产质量放行标准??梢愿菹钅康奶厥庖蠼卸ㄖ粕?,以满足不同的需求。

参考标准

Cell Back QC Specification
Plasmid identity Restriction enzyme mapping
Sequencing (double strand)
Plasmid yield Spectrophotometric determination
Plasmid genetic stability Segregating analysis
Host Cell Identity 16s rDNA Sequencing
Colony morphology
Gram staining
API 20E
Antibiotic resistance Multiple plates with various antibiotics
Cell Bank Viability CFU/mL plate count analysis
Host Cell Purity Visual observation method
Lytic Phage Contamination Plate bacterial cells on media
Plasmid QC Specification
DNA concentration UV 1mg/ml
Appearance Visual inspection Clear
A260/A280 Absorbance ratio 1.8-2.0
Restriction Digest AGE Consistent
Plasmid Form (% supercoiled) HPLC >90%
Host Protein ELISA < 1%
Host Cell Purity HPLC >90%
Residual E. coli DNA qPCR for host gDNA <0.1%
Residual E. coli RNA HPLC for host RNA <0.1%
Endotoxin PTS <10EU/mg
Mycoplasma PCR Not Detected
Sequencing GMP, incl. documentation Consistent
pH pH meter 7.0-8.5
Sterility USP <71> Sterility Test Not Detected

批次生产及放行

经过与客户确认后,根据工艺开发建立的流程,参照质量放行标准,金斯瑞开展放大至50L中 试生产,具体流程如下:

  1. 3批50L GMP级别中试生产,在搅拌式不锈钢生物反应器中进行并进行纯化。
  2. 对纯化后质粒进行各项放行检测。

工艺转移,资料撰写与临床申报

专家组及项目管理团队通过提交材料文件,会议及现场沟通等方式完成工艺,质量研究及技术的转移,并提供临床申报指导及材料的撰写,确保临床试验申报成功。

金斯瑞服务

Service Catalog No Milestone Service Application
临床申报质???br>GMP INDSet™ Plasmid Development SC2000
  1. Gene synthesis
  2. Cell bank
  3. Process development
  4. Analytical methods development
  5. Pilot manufacture and release
  6. Stability study
  7. Documentation
临床试验申请
GMP质粒生产
GMP-Compliant™ Plasmid Preparation
SC2001
  • 5 mg
  • 10 mg
  • 20 mg
  • 10L batch production (50mg)
  • 20L batch production (100mg)
  • 50L batch production (250mg)
  • 100L batch production(500mg)
临床试验I期
(早期临床试验)

询价和订购

Order by mail 邮箱: gene@genscript.com.cn
Order by phone 电话: 400-025-8686转5820
  • 农村的巨变是农业的巨变吗?变化概念, 2018-12-08
  • 《风暴舞》亮相上海电视节 或成年度期待大戏 2018-12-08
  • 中石油开放日:构建智能化陕京管道 坚守环保红线  2018-12-06
  • 对美加征关税相关新闻 2018-12-06
  • 四川茂县塌方最小伤者仅6岁爸爸爷爷当场遇难 2018-12-03
  • 重庆文艺网文艺频道引导页 2018-11-10
  • 承载历史使命的 “乡村振兴”,城乡共同参与 2018-09-11
  • 监察体制改革后 湘西半年72名公职人员主动交代问题 2018-09-10
  • 为人民谋幸福的前进脚步——十九大报告中的民生看点 2018-07-23
  • FONT COLOR=#FF0080欢迎订阅《光明日报》FONT 2018-07-23
  • 714| 538| 318| 647| 447| 970| 926| 771| 973| 267|